熒光顯微鏡的出現(xiàn)是為了彌補(bǔ)一般光學(xué)顯微鏡的缺陷，即難以將特定的目標(biāo)物從背景中區(qū)分出來。醫(yī)院病理科的日常工作之一就是讀片子，非常依賴經(jīng)驗(yàn)。因?yàn)榧词鼓撤N病原標(biāo)記物已經(jīng)經(jīng)過了標(biāo)識，在顯微鏡下仍然難以辨識。而熒光標(biāo)識只在特定波長的光源激發(fā)下才會發(fā)光，而且發(fā)出的光也具有特定的波長。多個標(biāo)識可以依次成像，背景極低，互相干擾也低，所以在科研和醫(yī)療中廣泛應(yīng)用。
熒光顯微鏡是熒光顯微檢測的專用工具,它是光學(xué)顯微鏡的一種。它除了具有光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)和光學(xué)放大作用外,基于熒光的特性,還具備以下*的功能要求:
(1)提供足夠能量的能激發(fā)出熒光的光源。
(2)有著適應(yīng)不同物質(zhì)所需的激發(fā)光譜一組濾色片,從光源中選擇合適的激發(fā)光譜,使析出的光譜與該物質(zhì)的吸收光譜重合,以期望獲得最大的熒光。
(3)為獲得較弱的熒光圖像,還要建立一套截止濾色片,它使所需觀察的熒光進(jìn)入系統(tǒng)成像,而將其余的光波,包括發(fā)射光阻擋在外,用來提高圖像的襯度。
(4)放大的光學(xué)系統(tǒng)應(yīng)適應(yīng)熒光的特性,最終獲得既能觀察又能攝影的高亮度、高分辨力的良好襯度的熒光圖像。
(5)儀器的安全性。應(yīng)用汞燈要防止紫外線的泄漏和汞燈的爆炸,保證電器安全。
其實(shí)熒光顯微鏡是利用特定波長的光照射被檢物體產(chǎn)生熒光進(jìn)行鏡檢的顯微光學(xué)觀測技術(shù)，已有100多年歷史。近年來，由于免疫熒光在醫(yī)學(xué)研究、診斷領(lǐng)域里的廣泛應(yīng)用，F(xiàn)ISH、綠色熒光蛋白(GFP)技術(shù)分別在基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)研究方面的推廣，顯微照相、數(shù)字CCD成像技術(shù)的輔助驅(qū)動，賦予這一傳統(tǒng)技術(shù)更新的應(yīng)用價值和生命力。
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