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中性洗滌纖維的測定方法

更新時間:2016-11-22      點擊次數:10402

應用濾袋技術測定中性洗滌纖維(NDF)的方法

Ringbio纖維分析儀

A. 試劑

(a)稱取30.0g十二烷基硫酸鈉(USP);18.61g 乙二胺四乙酸二鈉(Na2EDTA);6.81g四硼酸鈉(Na2B4O7)十水;4.56g磷酸氫二鈉(Na2HPO4-無水;10.0 ml三甘醇C6H14O4;全部溶解在1L水中,適當的攪拌和加熱有助于溶解。檢查適當的pH6.9—7.1

(b) α-淀粉酶(Alpha-amylase) 熱穩定細菌α-淀粉酶:活性為17,400 單位/ mL1個活性單位表示能將1 mg可溶性淀粉用30 min水解。

(c) 無水亞硫酸鈉(Na2SO3)。

(d) 丙酮:無色,并且蒸發后無殘渣。

B. 安全注意

(a) 丙酮易燃,操作時應在通風櫥中進行,避免吸入或與皮膚接觸。將濾袋放入烘箱之前,要確保濾袋*干燥,丙酮*揮發。

(b) 十二烷基硫酸鈉對黏膜有刺激,因此操作時要帶防塵口罩和手套。

C.設備

(a) 消化裝置- Ringbio纖維分析儀

(b) 濾袋- Ringbio濾袋

(c) 封口機

(d) 干燥器

(e) 分析天平-0.1mg

(f) 電熱干燥箱

(g) 耐溶劑記號筆

D. 步驟

(a) 濾袋和樣品的準備

1) 用耐溶劑的記號筆給濾袋編號,稱重(m 1)

2) 直接準確稱取0.5g (± 0.05 g )制備好的樣品 (m) 于濾袋中。樣品需要粉碎過1mm篩。

3) 在距離濾袋上邊緣大約4 mm用封口機封口。然后將樣品在濾袋中展平,均勻分布。

4) 至少取一個空白濾袋(C1),同時做空白測定。

5) 一次 多可以在濾袋架上放24個濾袋。無論放置濾袋數量多少,8層濾袋架上托盤要全部使用,每層放三個濾袋。層與層之間錯開120度。然后將裝有濾袋的支架放入纖維分析儀消煮器中,然后將金屬壓錘放在支架頂部,以確保消煮過程中不浮起。

6) 樣品含有大豆產品或脂肪超過5% ,將裝有樣品的濾袋放入帶蓋玻璃容器中,加丙酮使濾袋*浸沒,蓋好蓋子。搖動容器10次,浸泡10 分鐘。然后更換新的丙酮,重復上述操作一次。 后將濾袋取出,放在網篩上涼干。

例外:烘烤大豆,由于烘烤大豆的特殊性,需要采用改進后的下面脫脂方法。將裝有樣品的濾袋放入帶蓋玻璃容器中,加丙酮使濾袋*浸沒,蓋好蓋子。搖動容器10次,然后更換新的丙酮,浸泡12小時。取出濾袋,放在網篩上涼干。

(b) 當處理24個濾袋時,向2000 mL中性洗滌劑溶液中加無水亞硫酸鈉20 g (0.5 g/50 mL ND 溶液) 4.0 g 熱穩定α-淀粉酶。讓無水亞硫酸鈉在溶液中充分溶解。向容器中加入該溶液。如果處理樣品少于20 個濾袋,按照每個濾袋加100 mL酸溶液,但不能少于1500 mL,確保濾袋托盤*浸沒。

(c)  打開HEAT+AGITATE開關,確保濾袋支架攪拌正常。蓋上蓋子并*密封好。 儀器將加熱并維持溶液溫度100°C 設置處理時間75分鐘,包括加熱升溫時間。

(d) 時間到后加熱攪拌自動關停,消煮結束,按下EXHAUST按鍵,排出廢液,在打開蓋子之前一定將熱的溶液排完。

*警示:消煮器中的溶液是有壓力的。 在打開蓋子之前一定將廢液閥打開以釋放壓力。

(e) 溶液排完后,打開蓋子,關閉排液閥,加2L (70°C~90°C) 蒸餾水,并且第1和第2次淋洗時同時加α-淀粉酶,放下蓋子,但不旋緊。按下FLUSH按鍵,攪拌3~5 分鐘。按下EXHAUST按鍵,排掉廢液,重復2次,共淋洗3次。

(f) 后一次淋洗后,加冷的自來水以操作和使冷卻容器,為下輪測定做好準備。排干水,從容器中取出帶濾袋的支架。將濾袋從濾袋支架上取下來,輕輕擠壓去掉多余的水。然后將濾袋放入250 mL 燒杯中,加丙酮至浸沒濾袋,浸泡3~5 分鐘 ,然后取出并輕輕擠壓去掉多余的丙酮。

(g) 在通風櫥中展開濾袋,讓其自然干燥。*干燥后放入102°C±2°C 烘箱烘干4小時。

*警告:在丙酮*揮發掉之前不能把濾袋放入烘箱中。

(q) 從烘箱中取出濾袋,直接放入干燥器中冷卻至室溫,然后稱重(m2)。

E. 計算

試樣中中性洗滌纖維質量分數按以下公式計算。

NDF (%) = (m2- (m1 x C1)) x 100 / m

其中: m1 為空袋質量,gm為樣品質量,gm2 為提取處理后樣品殘渣+濾袋質量,gC1 為空白袋子校正系數(烘干后質量/原來質量)

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